タバコにおける光要求型除草剤耐性の分子的基盤

堀越守，豆塚弘毅，廣岡　卓

日本農薬学会誌 24, 17-22 (1999)

大腸菌のprotoporphyrinogenoxidase（Protox）遺伝子欠損変異株（SASX38）を用いた遺伝的相補法によって，タバコ葉から菓緑体及びミトコンドリア型Protox cDNAを単離し，全塩基配列を解明した．得られた塩基配列情報を利用し，光要求型除草剤pyraflufen-ethyl耐性タバコ細胞ETR-245株及び感受性株から，RT-PCRによって各々2種のProtox cDNAを増幅した．これらProtox cDNAによって生育を相補した大腸菌SASX38株に対するpyraflufen-ethylの生育阻害度を測定し，各遺伝子産物のpyraflufen-ethylに対する感受性を比較した．ミトコンドリア型遺伝子産物には感受性の差は認められなかったが，葉緑体型遺伝子産物ではETR-245株由来のものは感受性株由来のものに比べ，4000倍以上の耐性を示した．さらに，これら葉緑体型Protox cDNAの全塩基配列を比較した結果，1塩基にのみアミノ酸置換を伴う塩基の変異が認められた．したがって，この変異がETR-245株における光要求型除草剤耐性の原因であることが明らかとなった．